Terapia zastępcza dla dziedzicznego niedoboru enzymu – ukierunkowana na makrofagi glukocerebrozydaza w chorobie Gauchera.
Choroba Gauchera, najbardziej rozpowszechniona choroba spichrzania sfingolipidów, jest spowodowana niedoborem enzymu glukocerebrozydazy ( glukozyloceramidaza ). Zastąpienie enzymu zostało zaproponowane jako strategia terapeutyczna dla tego zaburzenia w 1966 roku. Aby ocenić skuteczność kliniczną tego podejścia, podaliśmy ukierunkowaną na makrofagi ludzką glukocerebrozydazę łożyskową (60 j.m. na kilogram masy ciała co 2 tygodnie przez 9 do 12 miesięcy) w 12 pacjenci z chorobą Gauchera typu 1, którzy mieli nieuszkodzoną śledzionę. Częstość wlewów zwiększono do raz w tygodniu u dwóch pacjentów (dzieci) podczas części badania, ponieważ mieli klinicznie agresywną chorobę.
Stężenie hemoglobiny wzrosło u wszystkich 12 pacjentów, a liczba płytek krwi u 7. Aktywność kwaśnej fosfatazy w surowicy zmniejszyła się u 10 pacjentów podczas badania, a poziom glukocerebrozydu w osoczu u 9. Objętość śledziony zmniejszyła się u wszystkich pacjentów po sześciu miesiącach leczenia, a wątroba objętość w pięciu. Wczesne oznaki poprawy stanu kośćca zaobserwowano u trzech pacjentów. Infuzje enzymu były dobrze tolerowane i nie wytworzyły się przeciwciała przeciwko egzogennemu enzymowi.
Dożylne podawanie glukocerebrozydazy ukierunkowanej na makrofagi powoduje obiektywną poprawę kliniczną u pacjentów z chorobą Gauchera typu 1. Hematologiczna i trzewna odpowiedź na zastąpienie enzymu rozwija się szybciej niż odpowiedź szkieletowa.
Mutacja beta-glukozydazy 2 powoduje chorobę spichrzania glikolipidów i upośledzenie płodności u mężczyzn.
- beta-glukozydaza 2 (GBA2) to enzym rezydentny retikulum endoplazmatycznego, który, jak się uważa, odgrywa rolę w metabolizmie koniugatów kwas żółciowy-glukoza.
- Aby uzyskać wgląd w biologiczną funkcję tego enzymu i jego substratów, wyhodowaliśmy myszy z niedoborem GBA2 i odkryliśmy, że zwierzęta te miały normalny metabolizm kwasów żółciowych. Samce z nokautem wykazywały upośledzoną płodność.
- Badanie mikroskopowe plemników ujawniło duże okrągłe główki (globozoospermia), nieprawidłowe akrosomy i wadliwą ruchomość. Glikolipidy, zidentyfikowane jako glukozyloceramidy metodą spektrometrii mas, akumulowały się w jądrach, mózgach i wątrobach myszy z nokautem, ale nie powodowały wyraźnych objawów neurologicznych, organomegalii ani skrócenia długości życia. Rekombinowany GBA2 hydrolizowany glukozyloceramid do glukozy i ceramidu; ta sama reakcja katalizowana przez kwas beta-glukozydazy 1 (GBA1) defektu u pacjentów z postacią choroby spichrzania lizosomalnego Gauchera.
- Wnioskujemy, że GBA2 jest glukozyloceramidazą , której utrata powoduje akumulację glikolipidów i chorobę spichrzania retikulum endoplazmatycznego
Ambroksol poprawia biochemię lizosomów w komórkach choroby Parkinsona związanych z mutacją glukocerebrozydazy.
- Choroba Gauchera jest spowodowana mutacjami w genie glukocerebrozydazy, który koduje glukozyloceramidazę hydrolazy lizosomalnej .
- Pacjenci z chorobą Gauchera i heterozygotycznymi nosicielami mutacji glukocerebrozydazy są narażeni na zwiększone ryzyko rozwoju choroby Parkinsona. Rzeczywiście, mutacje glukocerebrozydazy są najczęstszym czynnikiem ryzyka choroby Parkinsona w populacji ogólnej.
- Dlatego istnieje pilna potrzeba zrozumienia mechanizmów, dzięki którym mutacje glukocerebrozydazy predysponują do neurodegeneracji, aby ułatwić rozwój nowych metod leczenia.
- Aby to zbadać, wygenerowaliśmy linie fibroblastów z biopsji skóry pięciu pacjentów z chorobą Gauchera i sześciu heterozygotycznych nosicieli mutacji glukocerebrozydazy z chorobą Parkinsona i bez niej. Oznaczono poziomy aktywności białka i enzymu glukozyloceramidazy.
- Stres oksydacyjny oceniano za pomocą obrazowania pojedynczej komórki dihydroetydyny. Aktywność enzymu glukozyloceramidazy była istotnie zmniejszona w fibroblastach od pacjentów z chorobą Gauchera (mediana 5% kontroli, p = 0,0001) i heterozygotycznych nosicieli mutacji z (mediana 59% kontroli, p = 0,001) i bez (56% kontroli, p = 0,001) Choroba Parkinsona w porównaniu z kontrolą.
- Poziomy białka glukozyloceramidazy, oceniane metodą Western blot, były istotnie zmniejszone w fibroblastach z choroby Gauchera (mediana poziomu glukozyloceramidazy 42% kontroli, P < 0,001) i heterozygotycznych nosicieli mutacji z (mediana 59% kontroli, P < 0,001) i bez (mediana 68% kontroli, P < 0,001) Choroba Parkinsona.
- Obrazowanie pojedynczych komórek dihydroetydyny wykazało zwiększoną produkcję cytozolowych reaktywnych form tlenu w fibroblastach od pacjentów z chorobą Gauchera (szybkość utleniania dihydroetydyny wzrosła o medianę o 62% w porównaniu do kontroli, P < 0,001) i heterozygotycznych nosicieli mutacji (szybkość utleniania dihydroetydy wzrosła o mediana 68% w porównaniu z kontrolami, P < 0,001) i bez (szybkość utleniania dihydroetydyny wzrosła o medianę o 70% w porównaniu z kontrolami, P < 0,001) Choroba Parkinsona.
- Postawiliśmy hipotezę, że leczenie molekularnym chlorowodorkiem ambroksolu opiekuńczego poprawiłoby te nieprawidłowości biochemiczne. Leczenie chlorowodorkiem ambroksolu zwiększyło aktywność glukozyloceramidazy w fibroblastach ze zdrowych kontroli, choroby Gauchera i heterozygotycznych nosicieli mutacji glukocerebrozydazy z chorobą Parkinsona i bez niej. Było to związane ze znacznym zmniejszeniem szybkości utleniania dihydroetydyny o około 50% (P < 0,05) w fibroblastach z kontroli, chorobie Gauchera i heterozygotycznych nosicielach mutacji z chorobą Parkinsona i bez niej. Podsumowując, mutacje glukocerebrozydazy są związane ze zmniejszeniem aktywności glukozyloceramidazy i dowodami na stres oksydacyjny.
Human Glucosylceramidase (GBA) |
|||
1-CSB-BP009289HU(M) | Cusabio |
|
|
Mouse Glucosylceramidase (Gba) |
|||
1-CSB-YP009289MO | Cusabio |
|
|
Human Glucosylceramidase (GBA) |
|||
1-CSB-EP009289HU | Cusabio |
|
|
Human Glucosylceramidase (GBA) |
|||
1-CSB-EP009289HUb0 | Cusabio |
|
|
Human Glucosylceramidase (GBA) |
|||
1-CSB-EP009289HUe1 | Cusabio |
|
|
Mouse Glucosylceramidase (Gba) |
|||
1-CSB-EP009289MO | Cusabio |
|
|
Rat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E02G0418-192T | BlueGene | 192 tests | 1524 EUR |
Rat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E02G0418-48 | BlueGene | 1 plate of 48 wells | 624 EUR |
Rat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E02G0418-96 | BlueGene | 1 plate of 96 wells | 822 EUR |
Pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E07G0418-192T | BlueGene | 192 tests | 1524 EUR |
Pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E07G0418-48 | BlueGene | 1 plate of 48 wells | 624 EUR |
Pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E07G0418-96 | BlueGene | 1 plate of 96 wells | 822 EUR |
Dog Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E08G0418-192T | BlueGene | 192 tests | 1524 EUR |
Dog Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E08G0418-48 | BlueGene | 1 plate of 48 wells | 624 EUR |
Dog Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E08G0418-96 | BlueGene | 1 plate of 96 wells | 822 EUR |
Recombinant human Glucosylceramidase |
|||
P2611 | FN Test | 100ug | Ask for price |
Goat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E06G0418-192T | BlueGene | 192 tests | 1524 EUR |
Goat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E06G0418-48 | BlueGene | 1 plate of 48 wells | 624 EUR |
Goat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E06G0418-96 | BlueGene | 1 plate of 96 wells | 822 EUR |
Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
CSB-EL009289HU-24T | Cusabio | 1 plate of 24 wells | 198 EUR |
Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
1-CSB-EL009289HU | Cusabio |
|
|
Human GBA/ Glucosylceramidase ELISA Kit |
|||
E0981Hu | Sunlong | 1 Kit | 685.2 EUR |
Mouse Gba/ Glucosylceramidase ELISA Kit |
|||
E0580Mo | Sunlong | 1 Kit | 685.2 EUR |
Mouse Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E03G0418-192T | BlueGene | 192 tests | 1524 EUR |
Mouse Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E03G0418-48 | BlueGene | 1 plate of 48 wells | 624 EUR |
Mouse Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E03G0418-96 | BlueGene | 1 plate of 96 wells | 822 EUR |
Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E01G0418-192T | BlueGene | 192 tests | 1524 EUR |
Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E01G0418-48 | BlueGene | 1 plate of 48 wells | 624 EUR |
Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E01G0418-96 | BlueGene | 1 plate of 96 wells | 822 EUR |
Human GBA(Glucosylceramidase) ELISA Kit |
|||
EH1616 | FN Test | 96T | 681.12 EUR |
Mouse Glucosylceramidase, Gba ELISA KIT |
|||
ELI-04732m | Lifescience Market | 96 Tests | 1038 EUR |
Human Glucosylceramidase, GBA ELISA KIT |
|||
ELI-04733h | Lifescience Market | 96 Tests | 988.8 EUR |
Mouse Gba(Glucosylceramidase) ELISA Kit |
|||
EM0610 | FN Test | 96T | 681.12 EUR |
ELISA kit for Mouse Glucosylceramidase |
|||
EK3414 | SAB | 96 tests | 663.6 EUR |
ELISA kit for Human Glucosylceramidase |
|||
EK3415 | SAB | 96 tests | 663.6 EUR |
Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
YLA4175HU-48T | Shanghai YL Biotech | 48T | 435 EUR |
Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
YLA4175HU-96T | Shanghai YL Biotech | 96T | 562.5 EUR |
Rabbit Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E04G0418-192T | BlueGene | 192 tests | 1524 EUR |
Rabbit Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E04G0418-48 | BlueGene | 1 plate of 48 wells | 624 EUR |
Rabbit Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E04G0418-96 | BlueGene | 1 plate of 96 wells | 822 EUR |
Monkey Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E09G0418-192T | BlueGene | 192 tests | 1524 EUR |
Monkey Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E09G0418-48 | BlueGene | 1 plate of 48 wells | 624 EUR |
Monkey Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E09G0418-96 | BlueGene | 1 plate of 96 wells | 822 EUR |
Bovine Glucosylceramidase, GBA ELISA KIT |
|||
ELI-04734b | Lifescience Market | 96 Tests | 1113.6 EUR |
Porcine Glucosylceramidase, GBA ELISA KIT |
|||
ELI-04735p | Lifescience Market | 96 Tests | 1113.6 EUR |
Guinea pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E05G0418-192T | BlueGene | 192 tests | 1524 EUR |
Guinea pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E05G0418-48 | BlueGene | 1 plate of 48 wells | 624 EUR |
Guinea pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit |
|||
E05G0418-96 | BlueGene | 1 plate of 96 wells | 822 EUR |
GBA Antibody / Lysosomal acid glucosylceramidase |
|||
F54518-0.05ML | NSJ Bioreagents | 0.05 ml | 140.25 EUR |
GBA Antibody / Lysosomal acid glucosylceramidase |
|||
F54518-0.2ML | NSJ Bioreagents | 0.2 ml | 322.15 EUR |
GBA Antibody / Lysosomal acid glucosylceramidase |
|||
RQ5035 | NSJ Bioreagents | 100ul | 356.15 EUR |
Gba ELISA Kit| Mouse Glucosylceramidase ELISA Kit |
|||
EF013231 | Lifescience Market | 96 Tests | 826.8 EUR |
Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody |
|||
20-abx313916 | Abbexa |
|
|
Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody |
|||
abx233370-100ug | Abbexa | 100 ug | 577.2 EUR |
Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody |
|||
20-abx112736 | Abbexa |
|
|
Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody |
|||
abx122877-100ug | Abbexa | 100 ug | 469.2 EUR |
Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody (HRP) |
|||
20-abx313917 | Abbexa |
|
|
Human Non- lysosomal glucosylceramidase, GBA2 ELISA KIT |
|||
ELI-47370h | Lifescience Market | 96 Tests | 988.8 EUR |
Mouse Non- lysosomal glucosylceramidase, Gba2 ELISA KIT |
|||
ELI-27306m | Lifescience Market | 96 Tests | 1038 EUR |
Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody (FITC) |
|||
20-abx313918 | Abbexa |
|
|
Human Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) ELISA Kit |
|||
abx387505-96tests | Abbexa | 96 tests | 1093.2 EUR |
Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody (Biotin) |
|||
20-abx313919 | Abbexa |
|
|
Anti-GBA/Glucosylceramidase Rabbit Monoclonal Antibody |
|||
M01162 | BosterBio | 100ug/vial | 476.4 EUR |
Mouse glucosidase, beta; acid (includes glucosylceramidase) (GBA)ELISA kit |
|||
CSB-E17585m-24T | Cusabio | 1 plate of 24 wells | 198 EUR |
Mouse glucosidase, beta; acid (includes glucosylceramidase) (GBA)ELISA kit |
|||
1-CSB-E17585m | Cusabio |
|
|
?-Glucosidase Activity Colorimetric Assay Kit |
|||
K690-100 | Biovision | each | 660 EUR |
Glucose Isomerase Activity Assay Kit (Colorimetric) |
|||
K491-100 | Biovision | each | 588 EUR |
Glucose Dehydrogenase Activity Colorimetric Assay Kit |
|||
K786-100 | Biovision | each | 529.2 EUR |
Lysosomal ?-Glucosidase (GAA) Activity Assay Kit (Fluorometric) |
|||
K187-100 | Biovision | each | 666 EUR |
Glucose Oxidase Activity Colorimetric/Fluorometric Assay Kit |
|||
K788-100 | Biovision | each | 646.8 EUR |
Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase (G6PDH) Activity Assay Kit |
|||
MET-5081 | Cell Biolabs | 100 assays | 470.4 EUR |
Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase Activity Colorimetric Assay Kit |
|||
K757-100 | Biovision | each | 614.4 EUR |
Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase Activity Colorimetric Assay Kit |
|||
K2172-100 | ApexBio | 100 assays | 619.2 EUR |
Glucose Assay Kit |
|||
abx098429-Hitachi7020R140ml4R240ml1 | Abbexa | Hitachi 7020; R1: 40ml×4 R2: 40ml×1 | 266.4 EUR |
Glucose Assay Kit |
|||
abx098429-Hitachi7060R190ml2R245ml1 | Abbexa | Hitachi 7060; R1: 90ml×2 R2: 45ml×1 | 266.4 EUR |
Glucose Assay Kit |
|||
abx098429-Hitachi7170R132ml4R28ml4 | Abbexa | Hitachi 7170; R1: 32ml×4 R2: 8ml×4 | 266.4 EUR |
Glucose Assay Kit |
|||
abx090673-1Kit | Abbexa | 1 Kit | 284.4 EUR |
Glucose Assay Kit |
|||
55R-1449 | Fitzgerald | 100 assays | 847.2 EUR |
Glucose Assay Kit |
|||
55R-1458 | Fitzgerald | 100 assays | 888 EUR |
Glucose Assay Kit |
|||
55R-1494 | Fitzgerald | 100 assays | 847.2 EUR |
Glucose Assay Kit |
|||
Z5030025 | Biochain | 200 assays | 475 EUR |
PicoProbe? Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase Activity Assay Kit (Fluorometric) |
|||
K751-100 | Biovision | each | 744 EUR |
Gluconokinase (GntK) Activity Assay Kit (Colorimetric) |
|||
K319-100 | Biovision | each | 874.8 EUR |
Glucose (Serum) Assay Kit |
|||
abx298860-100Assays | Abbexa | 100 Assays | 698.4 EUR |
Glucose (Tissue) Assay Kit |
|||
abx097991-100Assays | Abbexa | 100 Assays | 717.6 EUR |
Glucose Oxidase Assay Kit |
|||
55R-1535 | Fitzgerald | 100 assays | 888 EUR |
Glucose Oxidase Assay Kit |
|||
abx298823-100Assays | Abbexa | 100 Assays | 604.8 EUR |
UDP Glucose Ceramide Glucosyltransferase (UGCG) Protein (Active) |
|||
20-abx655856 | Abbexa |
|
|
RealQuant Glucos Assay Kit |
|||
G0100-020 | GenDepot | 200 Assays | 984 EUR |
PicoProbeTM Glucokinase Activity Assay Kit (Fluorometric) |
|||
K969-100 | Biovision | each | 711.6 EUR |
Glucose Fluorometric Assay Kit |
|||
K2221-100 | ApexBio | 100 assays | 668.4 EUR |
Glucose Assay Kit (Colorimetric) |
|||
STA-680 | Cell Biolabs | 500 assays | 644.4 EUR |
Glucose Assay Kit (Fluorometric) |
|||
STA-681 | Cell Biolabs | 500 assays | 644.4 EUR |
Glucose Dehydrogenase Assay Kit |
|||
55R-1533 | Fitzgerald | 100 assays | 745.2 EUR |
EnzyChrom™ Glucose Assay Kit |
|||
EBGL-100 | BioAssay Systems | 100 | 379 EUR |
QuantiChrom™ Glucose Assay Kit |
|||
DIGL-100 | BioAssay Systems | 100 | 319 EUR |
Glucose-6-Phosphate Assay Kit |
|||
55R-1487 | Fitzgerald | 100 assays | 847.2 EUR |
Glucose Colorimetric Assay Kit II |
|||
K686-100 | Biovision | each | 614.4 EUR |
Glucose Colorimetric Assay Kit II |
|||
K2219-100 | ApexBio | 100 assays | 619.2 EUR |
EnzyChrom™ Glucose Assay Kit II |
|||
EGL2-100 | BioAssay Systems | 100 | 389 EUR |
Leczenie ambroksolem znacząco zwiększa aktywność glukozyloceramidazy i zmniejsza markery stresu oksydacyjnego w komórkach noszących mutacje glukocerebrozydazy. Proponujemy dalsze badania chlorowodorku ambroksolu jako potencjalnego leczenia choroby Parkinsona.