Terapia zastępcza dla dziedzicznego niedoboru enzymu – ukierunkowana na makrofagi glukocerebrozydaza w chorobie Gauchera.

Choroba Gauchera, najbardziej rozpowszechniona choroba spichrzania sfingolipidów, jest spowodowana niedoborem enzymu glukocerebrozydazy ( glukozyloceramidaza ). Zastąpienie enzymu zostało zaproponowane jako strategia terapeutyczna dla tego zaburzenia w 1966 roku. Aby ocenić skuteczność kliniczną tego podejścia, podaliśmy ukierunkowaną na makrofagi ludzką glukocerebrozydazę łożyskową (60 j.m. na kilogram masy ciała co 2 tygodnie przez 9 do 12 miesięcy) w 12 pacjenci z chorobą Gauchera typu 1, którzy mieli nieuszkodzoną śledzionę. Częstość wlewów zwiększono do raz w tygodniu u dwóch pacjentów (dzieci) podczas części badania, ponieważ mieli klinicznie agresywną chorobę.
Stężenie hemoglobiny wzrosło u wszystkich 12 pacjentów, a liczba płytek krwi u 7. Aktywność kwaśnej fosfatazy w surowicy zmniejszyła się u 10 pacjentów podczas badania, a poziom glukocerebrozydu w osoczu u 9. Objętość śledziony zmniejszyła się u wszystkich pacjentów po sześciu miesiącach leczenia, a wątroba objętość w pięciu. Wczesne oznaki poprawy stanu kośćca zaobserwowano u trzech pacjentów. Infuzje enzymu były dobrze tolerowane i nie wytworzyły się przeciwciała przeciwko egzogennemu enzymowi.

Dożylne podawanie glukocerebrozydazy ukierunkowanej na makrofagi powoduje obiektywną poprawę kliniczną u pacjentów z chorobą Gauchera typu 1. Hematologiczna i trzewna odpowiedź na zastąpienie enzymu rozwija się szybciej niż odpowiedź szkieletowa.

Mutacja beta-glukozydazy 2 powoduje chorobę spichrzania glikolipidów i upośledzenie płodności u mężczyzn.
  • beta-glukozydaza 2 (GBA2) to enzym rezydentny retikulum endoplazmatycznego, który, jak się uważa, odgrywa rolę w metabolizmie koniugatów kwas żółciowy-glukoza.
  • Aby uzyskać wgląd w biologiczną funkcję tego enzymu i jego substratów, wyhodowaliśmy myszy z niedoborem GBA2 i odkryliśmy, że zwierzęta te miały normalny metabolizm kwasów żółciowych. Samce z nokautem wykazywały upośledzoną płodność.
  • Badanie mikroskopowe plemników ujawniło duże okrągłe główki (globozoospermia), nieprawidłowe akrosomy i wadliwą ruchomość. Glikolipidy, zidentyfikowane jako glukozyloceramidy metodą spektrometrii mas, akumulowały się w jądrach, mózgach i wątrobach myszy z nokautem, ale nie powodowały wyraźnych objawów neurologicznych, organomegalii ani skrócenia długości życia. Rekombinowany GBA2 hydrolizowany glukozyloceramid do glukozy i ceramidu; ta sama reakcja katalizowana przez kwas beta-glukozydazy 1 (GBA1) defektu u pacjentów z postacią choroby spichrzania lizosomalnego Gauchera.
  • Wnioskujemy, że GBA2 jest  glukozyloceramidazą ,  której utrata powoduje akumulację glikolipidów i chorobę spichrzania retikulum endoplazmatycznego

Ambroksol poprawia biochemię lizosomów w komórkach choroby Parkinsona związanych z mutacją glukocerebrozydazy.

  • Choroba Gauchera jest spowodowana mutacjami w genie glukocerebrozydazy, który koduje  glukozyloceramidazę hydrolazy lizosomalnej .
  • Pacjenci z chorobą Gauchera i heterozygotycznymi nosicielami mutacji glukocerebrozydazy są narażeni na zwiększone ryzyko rozwoju choroby Parkinsona. Rzeczywiście, mutacje glukocerebrozydazy są najczęstszym czynnikiem ryzyka choroby Parkinsona w populacji ogólnej.
  • Dlatego istnieje pilna potrzeba zrozumienia mechanizmów, dzięki którym mutacje glukocerebrozydazy predysponują do neurodegeneracji, aby ułatwić rozwój nowych metod leczenia.
  • Aby to zbadać, wygenerowaliśmy linie fibroblastów z biopsji skóry pięciu pacjentów z chorobą Gauchera i sześciu heterozygotycznych nosicieli mutacji glukocerebrozydazy z chorobą Parkinsona i bez niej.  Oznaczono  poziomy aktywności białka i enzymu glukozyloceramidazy.
  • Stres oksydacyjny oceniano za pomocą obrazowania pojedynczej komórki dihydroetydyny. Aktywność enzymu glukozyloceramidazy była istotnie zmniejszona w fibroblastach od pacjentów z chorobą Gauchera (mediana 5% kontroli, p = 0,0001) i heterozygotycznych nosicieli mutacji z (mediana 59% kontroli, p = 0,001) i bez (56% kontroli, p = 0,001) Choroba Parkinsona w porównaniu z kontrolą.
  • Poziomy  białka glukozyloceramidazy, oceniane metodą Western blot, były istotnie zmniejszone w fibroblastach z choroby Gauchera (mediana  poziomu glukozyloceramidazy  42% kontroli, P < 0,001) i heterozygotycznych nosicieli mutacji z (mediana 59% kontroli, P < 0,001) i bez (mediana 68% kontroli, P < 0,001) Choroba Parkinsona.
  • Obrazowanie pojedynczych komórek dihydroetydyny wykazało zwiększoną produkcję cytozolowych reaktywnych form tlenu w fibroblastach od pacjentów z chorobą Gauchera (szybkość utleniania dihydroetydyny wzrosła o medianę o 62% w porównaniu do kontroli, P < 0,001) i heterozygotycznych nosicieli mutacji (szybkość utleniania dihydroetydy wzrosła o mediana 68% w porównaniu z kontrolami, P < 0,001) i bez (szybkość utleniania dihydroetydyny wzrosła o medianę o 70% w porównaniu z kontrolami, P < 0,001) Choroba Parkinsona.
  • Postawiliśmy hipotezę, że leczenie molekularnym chlorowodorkiem ambroksolu opiekuńczego poprawiłoby te nieprawidłowości biochemiczne. Leczenie chlorowodorkiem ambroksolu zwiększyło  aktywność glukozyloceramidazy  w fibroblastach ze zdrowych kontroli, choroby Gauchera i heterozygotycznych nosicieli mutacji glukocerebrozydazy z chorobą Parkinsona i bez niej. Było to związane ze znacznym zmniejszeniem szybkości utleniania dihydroetydyny o około 50% (P < 0,05) w fibroblastach z kontroli, chorobie Gauchera i heterozygotycznych nosicielach mutacji z chorobą Parkinsona i bez niej. Podsumowując, mutacje glukocerebrozydazy są związane ze zmniejszeniem  aktywności glukozyloceramidazy  i dowodami na stres oksydacyjny.

Glucosylceramidase Activity Assay Kit (Fluorometric)

K2003-100 Biovision 588 EUR

Mouse Glucosylceramidase (Gba)

1-CSB-YP009289MO Cusabio
  • 586.00 EUR
  • 299.00 EUR
  • 2172.00 EUR
  • 900.00 EUR
  • 1442.00 EUR
  • 382.00 EUR
  • 100ug
  • 10ug
  • 1MG
  • 200ug
  • 500ug
  • 50ug

Human Glucosylceramidase (GBA)

1-CSB-BP009289HU(M) Cusabio
  • 593.00 EUR
  • 255.00 EUR
  • 1481.00 EUR
  • 791.00 EUR
  • 1086.00 EUR
  • 347.00 EUR
  • 100ug
  • 10ug
  • 1MG
  • 200ug
  • 500ug
  • 50ug

Human Glucosylceramidase (GBA)

1-CSB-EP009289HU Cusabio
  • 380.00 EUR
  • 214.00 EUR
  • 1309.00 EUR
  • 560.00 EUR
  • 873.00 EUR
  • 262.00 EUR
  • 100ug
  • 10ug
  • 1MG
  • 200ug
  • 500ug
  • 50ug

Human Glucosylceramidase (GBA)

1-CSB-EP009289HUb0 Cusabio
  • 380.00 EUR
  • 214.00 EUR
  • 1309.00 EUR
  • 560.00 EUR
  • 873.00 EUR
  • 262.00 EUR
  • 100ug
  • 10ug
  • 1MG
  • 200ug
  • 500ug
  • 50ug

Human Glucosylceramidase (GBA)

1-CSB-EP009289HUe1 Cusabio
  • 496.00 EUR
  • 330.00 EUR
  • 1425.00 EUR
  • 677.00 EUR
  • 989.00 EUR
  • 378.00 EUR
  • 100ug
  • 10ug
  • 1MG
  • 200ug
  • 500ug
  • 50ug

Mouse Glucosylceramidase (Gba)

1-CSB-EP009289MO Cusabio
  • 505.00 EUR
  • 265.00 EUR
  • 1827.00 EUR
  • 766.00 EUR
  • 1218.00 EUR
  • 335.00 EUR
  • 100ug
  • 10ug
  • 1MG
  • 200ug
  • 500ug
  • 50ug

Recombinant human Glucosylceramidase

P2611 FN Test 100ug Ask for price

Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

CSB-EL009289HU-24T Cusabio 1 plate of 24 wells 165 EUR

Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

1-CSB-EL009289HU Cusabio
  • 804.00 EUR
  • 5099.00 EUR
  • 2704.00 EUR
  • 1 plate of 96 wells
  • 10 plates of 96 wells each
  • 5 plates of 96 wells each

Human GBA/ Glucosylceramidase ELISA Kit

E0981Hu Sunlong 1 Kit 571 EUR

Mouse Gba/ Glucosylceramidase ELISA Kit

E0580Mo Sunlong 1 Kit 571 EUR

Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody

abx122877-100ug Abbexa 100 ug 391 EUR

Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody

20-abx112736 Abbexa
  • 732.00 EUR
  • 398.00 EUR
  • 150 ul
  • 50 ul

Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody

20-abx313916 Abbexa
  • 411.00 EUR
  • 1845.00 EUR
  • 599.00 EUR
  • 182.00 EUR
  • 300.00 EUR
  • 100 ug
  • 1 mg
  • 200 ug
  • 20 ug
  • 50 ug

Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody

abx233370-100ug Abbexa 100 ug 481 EUR

ELISA kit for Mouse Glucosylceramidase

EK3414 SAB 96 tests 553 EUR

ELISA kit for Human Glucosylceramidase

EK3415 SAB 96 tests 553 EUR

Mouse Gba(Glucosylceramidase) ELISA Kit

EM0610 FN Test 96T 567.6 EUR

Human GBA(Glucosylceramidase) ELISA Kit

EH1616 FN Test 96T 567.6 EUR

Mouse Glucosylceramidase, Gba ELISA KIT

ELI-04732m Lifescience Market 96 Tests 865 EUR

Human Glucosylceramidase, GBA ELISA KIT

ELI-04733h Lifescience Market 96 Tests 824 EUR

Bovine Glucosylceramidase, GBA ELISA KIT

ELI-04734b Lifescience Market 96 Tests 928 EUR

Porcine Glucosylceramidase, GBA ELISA KIT

ELI-04735p Lifescience Market 96 Tests 928 EUR

Rat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E02G0418-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

Rat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E02G0418-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 520 EUR

Rat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E02G0418-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 685 EUR

Monkey Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E09G0418-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

Monkey Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E09G0418-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 520 EUR

Monkey Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E09G0418-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 685 EUR

Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E01G0418-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E01G0418-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 520 EUR

Human Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E01G0418-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 685 EUR

Mouse Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E03G0418-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

Mouse Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E03G0418-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 520 EUR

Mouse Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E03G0418-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 685 EUR

Pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E07G0418-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 685 EUR

Pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E07G0418-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

Pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E07G0418-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 520 EUR

Goat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E06G0418-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

Goat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E06G0418-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 520 EUR

Goat Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E06G0418-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 685 EUR

Rabbit Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E04G0418-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

Rabbit Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E04G0418-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 520 EUR

Rabbit Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E04G0418-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 685 EUR

Dog Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E08G0418-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

Dog Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E08G0418-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 520 EUR

Dog Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E08G0418-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 685 EUR

Anti-GBA/Glucosylceramidase Rabbit Monoclonal Antibody

M01162 BosterBio 100ug/vial 397 EUR

Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody (HRP)

20-abx313917 Abbexa
  • 411.00 EUR
  • 1845.00 EUR
  • 599.00 EUR
  • 182.00 EUR
  • 300.00 EUR
  • 100 ug
  • 1 mg
  • 200 ug
  • 20 ug
  • 50 ug

Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody (FITC)

20-abx313918 Abbexa
  • 411.00 EUR
  • 1845.00 EUR
  • 599.00 EUR
  • 182.00 EUR
  • 300.00 EUR
  • 100 ug
  • 1 mg
  • 200 ug
  • 20 ug
  • 50 ug

Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) Antibody (Biotin)

20-abx313919 Abbexa
  • 411.00 EUR
  • 1845.00 EUR
  • 599.00 EUR
  • 182.00 EUR
  • 300.00 EUR
  • 100 ug
  • 1 mg
  • 200 ug
  • 20 ug
  • 50 ug

Guinea pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E05G0418-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

Guinea pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E05G0418-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 520 EUR

Guinea pig Glucosylceramidase(GBA) ELISA kit

E05G0418-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 685 EUR

Human Non-Lysosomal Glucosylceramidase (GBA2) ELISA Kit

abx387505-96tests Abbexa 96 tests 911 EUR

Mouse Non- lysosomal glucosylceramidase, Gba2 ELISA KIT

ELI-27306m Lifescience Market 96 Tests 865 EUR

Human Non- lysosomal glucosylceramidase, GBA2 ELISA KIT

ELI-47370h Lifescience Market 96 Tests 824 EUR

Gba ELISA Kit| Mouse Glucosylceramidase ELISA Kit

EF013231 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

XTT CELL VIABILITY ASSAY KIT (1000 ASSAY)

30007 Biotium 1KIT 236 EUR

Mouse glucosidase, beta; acid (includes glucosylceramidase) (GBA)ELISA kit

CSB-E17585m-24T Cusabio 1 plate of 24 wells 165 EUR

Mouse glucosidase, beta; acid (includes glucosylceramidase) (GBA)ELISA kit

1-CSB-E17585m Cusabio
  • 900.00 EUR
  • 5476.00 EUR
  • 2900.00 EUR
  • 1 plate of 96 wells
  • 10 plates of 96 wells each
  • 5 plates of 96 wells each

Endothelial Tube Formation Assay (In Vitro Angiogenesis Assay)

CBA-200 Cell Biolabs 50 assays 560 EUR

Assay Buffer, 28ML

X005-28ML Arbor Assays 28ML 109 EUR

Assay Diluent, 12ML

X017-12ML Arbor Assays 12ML 128 EUR

Assay Diluent, 6ML

X017-6ML Arbor Assays 6ML 112 EUR

Assay Buffer, 45ML

X033-45ML Arbor Assays 45ML 109 EUR

Assay Buffer, 225ML

X040-225ML Arbor Assays 225ML 158 EUR

Assay Buffer, 60ML

X047-60ML Arbor Assays 60ML 122 EUR

Assay Buffer, 28ML

X053-28ML Arbor Assays 28ML 123 EUR

Assay Buffer, 55ML

X053-55ML Arbor Assays 55ML 153 EUR

Assay Buffer, 60ML

X089-60ML Arbor Assays 60ML 109 EUR

Assay Buffer, 50ML

X100-50ML Arbor Assays 50ML 109 EUR

Assay Buffer, 50ML

X117-50ML Arbor Assays 50ML 143 EUR

Lactose Assay Kit

MET-5001 Cell Biolabs 100 assays 432 EUR

Bilirubin Assay Kit

MET-5010 Cell Biolabs 200 assays 479 EUR

Pyruvate Assay Kit

MET-5029 Cell Biolabs 100 assays 479 EUR

Glycine Assay Kit

MET-5070 Cell Biolabs 100 assays 450 EUR

Taurine Assay Kit

MET-5071 Cell Biolabs 200 assays 508 EUR

Sarcosine Assay Kit

MET-5072 Cell Biolabs 100 assays 450 EUR

Tyrosine Assay Kit

MET-5073 Cell Biolabs 100 assays 450 EUR

Phospholipid Assay Kit

MET-5085 Cell Biolabs 96 assays 456 EUR

Ammonia Assay Kit

MET-5086 Cell Biolabs 100 assays 456 EUR

Adenosine Assay Kit

MET-5090 Cell Biolabs 100 assays 508 EUR

Inosine Assay Kit

MET-5092 Cell Biolabs 100 assays 508 EUR

Alanine Assay Kit

MET-5093 Cell Biolabs 200 assays 508 EUR

Urea Assay Kit

STA-382 Cell Biolabs 192 assays 635 EUR

Rac1 Activation Assay

STA-401-1 Cell Biolabs 20 assays 757 EUR

Rac2 Activation Assay

STA-401-2 Cell Biolabs 20 assays 757 EUR

Cdc42 Activation Assay

STA-402 Cell Biolabs 20 assays 757 EUR

RhoA Activation Assay

STA-403-A Cell Biolabs 20 assays 757 EUR

RhoB Activation Assay

STA-403-B Cell Biolabs 20 assays 757 EUR

RhoC Activation Assay

STA-403-C Cell Biolabs 20 assays 757 EUR

Arf1 Activation Assay

STA-407-1 Cell Biolabs 20 assays 757 EUR

Arf6 Activation Assay

STA-407-6 Cell Biolabs 20 assays 757 EUR

Ral Activation Assay

STA-408 Cell Biolabs 20 assays 757 EUR

Ran Activation Assay

STA-409 Cell Biolabs 20 assays 757 EUR

Phosphatidylcholine Assay Kit

STA-600 Cell Biolabs 96 assays 519 EUR

Sphingomyelin Assay Kit

STA-601 Cell Biolabs 96 assays 519 EUR

Glutamate Assay Kit

STA-674 Cell Biolabs 200 assays 514 EUR

Leczenie ambroksolem znacząco zwiększa  aktywność glukozyloceramidazy  i zmniejsza markery stresu oksydacyjnego w komórkach noszących mutacje glukocerebrozydazy. Proponujemy dalsze badania chlorowodorku ambroksolu jako potencjalnego leczenia choroby Parkinsona.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.