Ocena immunotoksyczności dla nowego inhibitora kinazy tyrozynowej śledziony R406.

    • Kinaza tyrozynowa Cdna 8Spleen (Syk) to nowy cel farmaceutyczny w leczeniu chorób alergicznych, autoimmunologicznych i nowotworowych. Wcześniejsze badania wykazały, że sygnalizacja Syk odgrywa kluczową rolę w regulacji układu limfohematopoetycznego.
    • Obserwacje te skłoniły nas do zbadania, czy hamowanie Syk będzie promować immunotoksyczność. W serii badań  szczurom  podawano doustnie R406 w dawkach do 100 mg/kg/dobę włącznie (lub jego prolek R788 w dawkach do 100 mg/kg/dobę włącznie, zmniejszonych do 50 mg/dobę). kg/dzień dla kobiet po przekroczeniu MTD), silnym inhibitorem Syk, dwa razy dziennie przez 28 dni.
    • Oprócz  standardowych  ocen toksykologicznych przeprowadzono immunofenotypowanie metodą cytometrii przepływowej oraz badanie humoralnej odpowiedzi immunologicznej mierząc  poziomy przeciwciał IgM  i IgG anty – KLH .  Inne badania immunotoksyczności obejmowały trzy modele oporności żywiciela u samic myszy Balb/c w celu dalszego ustalenia wpływu R406 na odporność wrodzoną i nabytą.
    • Po leczeniu R406 w badaniach na szczurach zaobserwowano oczekiwane działanie immunomodulujące (np. zmniejszenie masy grasicy i śledziony, ubytek komórek szpiku kostnego i zmniejszenie liczby limfocytów, w tym limfocytów T i B)   .
    • Zmiany te zasadniczo ustąpiły podczas 14-dniowego okresu rekonwalescencji bez leczenia. Prowokacja  KLH  u  szczurów  wykazała brak niekorzystnego wpływu na odpowiedź IgG lub  IgM  . R788/406, podawany doustnie w dawkach do 80 mg/kg/dobę włącznie przez 28 dni, nie wpływał na klirens bakterii lub wirusów odpowiednio w mysich modelach oporności u gospodarzy Listeria, paciorkowce lub grypa.
    • Korelowało to z wcześniejszymi testami funkcji makrofagów i neutrofili in vitro (ocena jonów migrujących, fagocytozy, wybuchu oksydacyjnego i aktywności bakteriobójczej), które wykazały, że R406 nie wpływa niekorzystnie na funkcję makrofagów lub neutrofili we wrodzonych odpowiedziach immunologicznych.
    • Podsumowując, wyniki te pokazują , że R406 ma minimalną funkcjonalną immunotoksyczność pomimo jego działania limfocytopenicznego, co sugeruje, że hamowanie Syk może nie prowadzić do niedopuszczalnych działań niepożądanych opartych na mechanizmach.

 

Aby przetestować możliwość, że IL-10 działa jako autokrynny lub parakrynny czynnik wzrostu dla komórek B Ly-1, leczyliśmy myszy nieprzerwanie od urodzenia do 8 tygodnia życia monoklonalnym  szczurzym  przeciwciałem IgM  , które specyficznie neutralizuje mysią IL-10. Myszy leczone w ten sposób pozbawione były komórek Ly-1 B rezydujących w otrzewnej, zawierały znacznie obniżone poziomy immunoglobulin M w surowicy i nie były w stanie wytworzyć znaczących odpowiedzi przeciwciał in vivo  na wstrzyknięcia dootrzewnowe alfa 1,3-dekstranu lub fosforylocholiny,  anty genów, dla których specyficzne komórki B znajdują się w podzbiorze komórek B Ly-1.

W przeciwieństwie do tego, konwencjonalne komórki B śledziony  myszy traktowanych anty -IL-10 były prawidłowe pod względem całkowitej liczby, fenotypu i odpowiedzi in vitro na mitogeny komórek B i zależną od grasicy  antygen trinitrofenylo-hemocyjaninę skałoczepa (TNP- KLH ). ).

Mechanizm deplecji limfocytów B Ly-1 wydaje się być związany z podwyższeniem poziomów endogennego interferonu gamma (IFN-gamma) u  myszy leczonych anty-IL-10, ponieważ współadministrowali neutralizujące przeciwciała  anty-IFN-gamma subst anty  IL-  10 . alli przywrócił liczbę limfocytów B Ly-1 rezydujących w otrzewnej u tych myszy. Wyniki te sugerują, że IL-10 jest regulatorem rozwoju limfocytów B Ly-1 i identyfikują procedurę specyficznego zubażania limfocytów B Ly-1, umożliwiając w ten sposób dalszą ocenę roli tych komórek w układzie odpornościowym.

Ocena immunotoksyczności dla nowego inhibitora kinazy tyrozynowej śledziony R406.

Kinaza tyrozynowa śledziony (Syk) to nowy cel farmaceutyczny w leczeniu schorzeń alergicznych, autoimmunologicznych i nowotworowych. Wcześniejsze badania wykazały, że sygnalizacja Syk odgrywa kluczową rolę w regulacji układu limfohematopoetycznego. Obserwacje te skłoniły nas do zbadania, czy hamowanie Syk będzie promować immunotoksyczność.

W serii badań  szczurom  podawano doustnie R406 w dawkach do 100 mg/kg/dobę włącznie (lub jego prolek R788 w dawkach do 100 mg/kg/dobę włącznie, zmniejszonych do 50 mg/dobę). kg/dzień dla kobiet po przekroczeniu MTD), silnym inhibitorem Syk, dwa razy dziennie przez 28 dni.

Oprócz standardowych ocen toksykologicznych przeprowadzono immunofenotypowanie metodą cytometrii przepływowej oraz badanie humoralnej odpowiedzi immunologicznej mierząc  poziomy przeciwciał IgM  i IgG anty – KLH .  Inne badania immunotoksyczności obejmowały trzy modele oporności żywiciela u samic myszy Balb/c w celu dalszego ustalenia wpływu R406 na odporność wrodzoną i nabytą.

Po leczeniu R406 w badaniach na szczurach zaobserwowano oczekiwane działanie immunomodulujące (np. zmniejszenie masy grasicy i śledziony, ubytek komórek szpiku kostnego i zmniejszenie liczby limfocytów, w tym limfocytów T i B)   . Zmiany te zasadniczo ustąpiły po 14-dniowym okresie rekonwalescencji bez leczenia . Prowokacja  KLH  u  szczurów  wykazała brak niekorzystnego wpływu na odpowiedź IgG lub  IgM  . R788/406, podawany doustnie w dawkach do 80 mg/kg/dobę włącznie przez 28 dni, nie wpływał na klirens bakterii lub wirusów odpowiednio w mysich modelach oporności u gospodarzy Listeria, paciorkowce lub grypa.

Human IgM Standards A-F

F171 Cygnus Technologies 1 ml 488 EUR

Mouse IgM Standards Set, A-F

F093 Cygnus Technologies 1 ml 411 EUR

Vaccigel Alum adjuvant adsorbed with Keyhole limpet hemocyanin (KLH @1 mg/ml), Vaccine adjuvant

AV-1010-KLH Alpha Diagnostics 1 ml 286 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RD-IgM-Ra-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 419 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RD-IgM-Ra-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 577 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Ra-48T DL Develop 48T 426 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Ra-96T DL Develop 96T 549 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Ra-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 437 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Ra-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 603 EUR

Rabbit Polyclonal antibody Anti-CRBN

Anti-CRBN ImmunoStep 50 µg 349 EUR

EXOCET Standards

EXOCET-SD-1 SBI 202 EUR

Mouse Anti-Meningococcal A/C/W/Y Oligosaccharides IgM (Combo) ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

600-889-IGM Alpha Diagnostics 1 Kit 895 EUR

Mouse Anti KLH McAb

E61I01501 EnoGene 100ug 343 EUR

Anti-BNP antibody (KLH)

STJ97879 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-BNP antibody (KLH)

STJ97880 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-BNP antibody (KLH)

STJ97881 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-Calnexin antibody (KLH)

STJ97891 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-Calregulin antibody (KLH)

STJ97892 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-cAMP antibody (KLH)

STJ97893 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-CD20 antibody (KLH)

STJ97914 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-Clenbuterol antibody (KLH)

STJ97960 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-Flag antibody (KLH)

STJ98077 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-MTAP Antibody (KLH)

STJ503536 St John's Laboratory 100 µg 586 EUR

Mouse Keyhole Limpet Hemocyanin (KLH IgM) ELISA Kit

abx053480-96tests Abbexa 96 tests 668 EUR

Human Anti-Meningococcal Group A/C/W/Y Oligosaccharides IgM (Combo) ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

600-884-IGM Alpha Diagnostics 1 Kit 1017 EUR

Human Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-145-KLM Alpha Diagnostics 1 Kit 773 EUR

Mouse Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-155-VAM Alpha Diagnostics 1 Kit 712 EUR

Monkey Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-180-KLM Alpha Diagnostics 1 Kit 773 EUR

Canine Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-190-KLM Alpha Diagnostics 1 Kit 773 EUR

Rat(anti-CMV IgM)

QY-E11747 Qayee Biotechnology 96T 374 EUR

Rabbit anti Rat IgM

40C-CB1264 Fitzgerald 2 mg 285 EUR

Goat anti Rat IgM

40C-CB1271 Fitzgerald 1 mg 363 EUR

Rat anti Mouse IgM

41R-1116 Fitzgerald 100 ug 265 EUR

Mouse anti Rat IgM

41R-1122 Fitzgerald 100 ug 265 EUR

Mouse anti Rat IgM

41R-1123 Fitzgerald 100 ug 265 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RD-IgM-b-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 453 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RD-IgM-b-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 625 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-b-48T DL Develop 48T 456 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-b-96T DL Develop 96T 590 EUR

Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Ch-48T DL Develop 48T 426 EUR

Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Ch-96T DL Develop 96T 549 EUR

Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Hu-48T DL Develop 48T 404 EUR

Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Hu-96T DL Develop 96T 518 EUR

Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Mu-48T DL Develop 48T 411 EUR

Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Mu-96T DL Develop 96T 528 EUR

Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Rb-48T DL Develop 48T 508 EUR

Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Rb-96T DL Develop 96T 661 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-b-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 473 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-b-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 654 EUR

Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Ch-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 437 EUR

Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Ch-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 603 EUR

Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Hu-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 411 EUR

Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Hu-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 565 EUR

Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Mu-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 419 EUR

Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Mu-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 578 EUR

Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Rb-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 534 EUR

Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Rb-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 742 EUR

Mouse keyhole limpet hemocyanin (KLH) antibody (IgM) ELISA kit

CSB-E13375m-24T Cusabio 1 plate of 24 wells 165 EUR

Mouse keyhole limpet hemocyanin (KLH) antibody (IgM) ELISA kit

1-CSB-E13375m Cusabio
  • 900.00 EUR
  • 5476.00 EUR
  • 2900.00 EUR
  • 1 plate of 96 wells
  • 10 plates of 96 wells each
  • 5 plates of 96 wells each

Human keyhole limpet hemocyanin(KLH) antibody(IgM) ELISA Kit

CSB-E16534h-24T Cusabio 1 plate of 24 wells 165 EUR

Human keyhole limpet hemocyanin(KLH) antibody(IgM) ELISA Kit

1-CSB-E16534h Cusabio
  • 900.00 EUR
  • 5476.00 EUR
  • 2900.00 EUR
  • 1 plate of 96 wells
  • 10 plates of 96 wells each
  • 5 plates of 96 wells each

Lyophilized Exosome Standards

ExoA375 ImmunoStep 100 μg 303.5 EUR

Lyophilized Exosome Standards

ExoHT29 ImmunoStep 100 μg 303.5 EUR

Lyophilized Exosome Standards

ExoMCF7 ImmunoStep 100 μg 303.5 EUR

Lyophilized Exosome Standards

ExoPC3 ImmunoStep 100 μg 303.5 EUR

Lyophilized Exosome Standards

ExoPLASMA ImmunoStep 100 μg 303.5 EUR

Lyophilized Exosome Standards

ExoUrine ImmunoStep 100 μg 303.5 EUR

Anti-Actin beta antibody (KLH)

STJ97814 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-Bcl-2 antibody (KLH)

STJ97860 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-E alpha antibody (KLH)

STJ98053 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-Ki-67 antibody (KLH)

STJ98194 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-Ki-67 antibody (KLH)

STJ98195 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-PARP-1 antibody (KLH)

STJ98308 St John's Laboratory 100 µl 234 EUR

Anti-Myc-tag antibody (KLH)

STJ90105 St John's Laboratory 200 µl 197 EUR

Anti-His-tag antibody (KLH)

STJ90106 St John's Laboratory 200 µl 197 EUR

Anti-HA-tag antibody (KLH)

STJ90107 St John's Laboratory 200 µl 197 EUR

Anti-FLAG-tag antibody (KLH)

STJ90108 St John's Laboratory 200 µl 197 EUR

Human Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgG+IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-135-KGM Alpha Diagnostics 1 kit 773 EUR

Bovine/Cow Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-205-KLM Alpha Diagnostics 1 Kit 712 EUR

Rat KLH ELISA Kit

ERK0075 Abclonal 96Tests 521 EUR

Goat anti-Rat IgM Antibody

abx401442-05mg Abbexa 0.5 mg 370 EUR

Goat Anti-Rat IgM-AP

LF-SA8011AP Abfrontier 1.0 ml 353 EUR

Goat Anti-Rat IgM-BIOT

LF-SA8011B Abfrontier 1.0 mg 312 EUR

Goat Anti-Rat IgM-FITC

LF-SA8011F Abfrontier 1.0 mg 274 EUR

Goat Anti-Rat IgM-HRP

LF-SA8011H Abfrontier 1.0 ml 280 EUR

Goat Anti-Rat IgM-PE

LF-SA8011P Abfrontier 0.5 mg 437 EUR

Goat Anti-Rat IgM-TXRD

LF-SA8011T Abfrontier 1.0 mg 245 EUR

Goat Anti-Rat IgM-TRITC

LF-SA8011TR Abfrontier 1.0 mg 266 EUR

Goat Anti-Rat IgM-UNLB

LF-SA8011U Abfrontier 1.0 mg 261 EUR

Rabbit anti Rat IgM (FITC)

43C-CB1265 Fitzgerald 1.5 mg 289 EUR

Rabbit anti Rat IgM (rhodamine)

43C-CB1266 Fitzgerald 1.5 mg 303 EUR

Rabbit anti Rat IgM (biotin)

43C-CB1268 Fitzgerald 1.5 mg 368 EUR

Rabbit anti Rat IgM (HRP)

43C-CB1269 Fitzgerald 1.5 mg 399 EUR

Goat anti Rat IgM (FITC)

43C-CB1272 Fitzgerald 1 mg 364 EUR

Goat anti Rat IgM (rhodamine)

43C-CB1273 Fitzgerald 1 mg 402 EUR

Goat anti Rat IgM (biotin)

43C-CB1275 Fitzgerald 1 mg 389 EUR

Goat anti Rat IgM (HRP)

43C-CB1276 Fitzgerald 1 mg 445 EUR

Mouse anti Rat IgM (HRP)

43R-1632 Fitzgerald 100 ug 282 EUR

Mouse anti Rat IgM (HRP)

43R-1633 Fitzgerald 100 ug 282 EUR

Custom production of antibodies in 5 Rats using customer supplied antigen (std 63 days protocol)

RAT-5 Alpha Diagnostics 1 1138 EUR

Korelowało to z wcześniejszymi testami funkcji makrofagów i neutrofili in vitro (ocena jonów migrujących, fagocytozy, wybuchu oksydacyjnego i aktywności bakteriobójczej), które wykazały, że R406 nie wpływa niekorzystnie na funkcję makrofagów lub neutrofili we wrodzonych odpowiedziach immunologicznych. Podsumowując, wyniki te pokazują , że R406 ma minimalną funkcjonalną immunotoksyczność pomimo jego działania limfocytopenicznego, co sugeruje, że hamowanie Syk może nie prowadzić do niedopuszczalnych działań niepożądanych opartych na mechanizmach.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany. Wymagane pola są oznaczone *