Ocena immunotoksyczności dla nowego inhibitora kinazy tyrozynowej śledziony R406.

    • Kinaza tyrozynowa Cdna 8Spleen (Syk) to nowy cel farmaceutyczny w leczeniu chorób alergicznych, autoimmunologicznych i nowotworowych. Wcześniejsze badania wykazały, że sygnalizacja Syk odgrywa kluczową rolę w regulacji układu limfohematopoetycznego.
    • Obserwacje te skłoniły nas do zbadania, czy hamowanie Syk będzie promować immunotoksyczność. W serii badań  szczurom  podawano doustnie R406 w dawkach do 100 mg/kg/dobę włącznie (lub jego prolek R788 w dawkach do 100 mg/kg/dobę włącznie, zmniejszonych do 50 mg/dobę). kg/dzień dla kobiet po przekroczeniu MTD), silnym inhibitorem Syk, dwa razy dziennie przez 28 dni.
    • Oprócz  standardowych  ocen toksykologicznych przeprowadzono immunofenotypowanie metodą cytometrii przepływowej oraz badanie humoralnej odpowiedzi immunologicznej mierząc  poziomy przeciwciał IgM  i IgG anty – KLH .  Inne badania immunotoksyczności obejmowały trzy modele oporności żywiciela u samic myszy Balb/c w celu dalszego ustalenia wpływu R406 na odporność wrodzoną i nabytą.
    • Po leczeniu R406 w badaniach na szczurach zaobserwowano oczekiwane działanie immunomodulujące (np. zmniejszenie masy grasicy i śledziony, ubytek komórek szpiku kostnego i zmniejszenie liczby limfocytów, w tym limfocytów T i B)   .
    • Zmiany te zasadniczo ustąpiły podczas 14-dniowego okresu rekonwalescencji bez leczenia. Prowokacja  KLH  u  szczurów  wykazała brak niekorzystnego wpływu na odpowiedź IgG lub  IgM  . R788/406, podawany doustnie w dawkach do 80 mg/kg/dobę włącznie przez 28 dni, nie wpływał na klirens bakterii lub wirusów odpowiednio w mysich modelach oporności u gospodarzy Listeria, paciorkowce lub grypa.
    • Korelowało to z wcześniejszymi testami funkcji makrofagów i neutrofili in vitro (ocena jonów migrujących, fagocytozy, wybuchu oksydacyjnego i aktywności bakteriobójczej), które wykazały, że R406 nie wpływa niekorzystnie na funkcję makrofagów lub neutrofili we wrodzonych odpowiedziach immunologicznych.
    • Podsumowując, wyniki te pokazują , że R406 ma minimalną funkcjonalną immunotoksyczność pomimo jego działania limfocytopenicznego, co sugeruje, że hamowanie Syk może nie prowadzić do niedopuszczalnych działań niepożądanych opartych na mechanizmach.

 

Aby przetestować możliwość, że IL-10 działa jako autokrynny lub parakrynny czynnik wzrostu dla komórek B Ly-1, leczyliśmy myszy nieprzerwanie od urodzenia do 8 tygodnia życia monoklonalnym  szczurzym  przeciwciałem IgM  , które specyficznie neutralizuje mysią IL-10. Myszy leczone w ten sposób pozbawione były komórek Ly-1 B rezydujących w otrzewnej, zawierały znacznie obniżone poziomy immunoglobulin M w surowicy i nie były w stanie wytworzyć znaczących odpowiedzi przeciwciał in vivo  na wstrzyknięcia dootrzewnowe alfa 1,3-dekstranu lub fosforylocholiny,  anty genów, dla których specyficzne komórki B znajdują się w podzbiorze komórek B Ly-1.

W przeciwieństwie do tego, konwencjonalne komórki B śledziony  myszy traktowanych anty -IL-10 były prawidłowe pod względem całkowitej liczby, fenotypu i odpowiedzi in vitro na mitogeny komórek B i zależną od grasicy  antygen trinitrofenylo-hemocyjaninę skałoczepa (TNP- KLH ). ).

Mechanizm deplecji limfocytów B Ly-1 wydaje się być związany z podwyższeniem poziomów endogennego interferonu gamma (IFN-gamma) u  myszy leczonych anty-IL-10, ponieważ współadministrowali neutralizujące przeciwciała  anty-IFN-gamma subst anty  IL-  10 . alli przywrócił liczbę limfocytów B Ly-1 rezydujących w otrzewnej u tych myszy. Wyniki te sugerują, że IL-10 jest regulatorem rozwoju limfocytów B Ly-1 i identyfikują procedurę specyficznego zubażania limfocytów B Ly-1, umożliwiając w ten sposób dalszą ocenę roli tych komórek w układzie odpornościowym.

Ocena immunotoksyczności dla nowego inhibitora kinazy tyrozynowej śledziony R406.

Kinaza tyrozynowa śledziony (Syk) to nowy cel farmaceutyczny w leczeniu schorzeń alergicznych, autoimmunologicznych i nowotworowych. Wcześniejsze badania wykazały, że sygnalizacja Syk odgrywa kluczową rolę w regulacji układu limfohematopoetycznego. Obserwacje te skłoniły nas do zbadania, czy hamowanie Syk będzie promować immunotoksyczność.

W serii badań  szczurom  podawano doustnie R406 w dawkach do 100 mg/kg/dobę włącznie (lub jego prolek R788 w dawkach do 100 mg/kg/dobę włącznie, zmniejszonych do 50 mg/dobę). kg/dzień dla kobiet po przekroczeniu MTD), silnym inhibitorem Syk, dwa razy dziennie przez 28 dni.

Oprócz standardowych ocen toksykologicznych przeprowadzono immunofenotypowanie metodą cytometrii przepływowej oraz badanie humoralnej odpowiedzi immunologicznej mierząc  poziomy przeciwciał IgM  i IgG anty – KLH .  Inne badania immunotoksyczności obejmowały trzy modele oporności żywiciela u samic myszy Balb/c w celu dalszego ustalenia wpływu R406 na odporność wrodzoną i nabytą.

Po leczeniu R406 w badaniach na szczurach zaobserwowano oczekiwane działanie immunomodulujące (np. zmniejszenie masy grasicy i śledziony, ubytek komórek szpiku kostnego i zmniejszenie liczby limfocytów, w tym limfocytów T i B)   . Zmiany te zasadniczo ustąpiły po 14-dniowym okresie rekonwalescencji bez leczenia . Prowokacja  KLH  u  szczurów  wykazała brak niekorzystnego wpływu na odpowiedź IgG lub  IgM  . R788/406, podawany doustnie w dawkach do 80 mg/kg/dobę włącznie przez 28 dni, nie wpływał na klirens bakterii lub wirusów odpowiednio w mysich modelach oporności u gospodarzy Listeria, paciorkowce lub grypa.

Human IgM Standards A-F

F171 Cygnus Technologies 1 ml 585.6 EUR

Mouse IgM Standards Set, A-F

F093 Cygnus Technologies 1 ml 493.2 EUR

Vaccigel Alum adjuvant adsorbed with Keyhole limpet hemocyanin (KLH @1 mg/ml), Vaccine adjuvant

AV-1010-KLH Alpha Diagnostics 1 ml 343.2 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Ra-48T DL Develop 48T 511.2 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Ra-96T DL Develop 96T 658.8 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RD-IgM-Ra-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 502.8 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RD-IgM-Ra-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 692.4 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Ra-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 524.4 EUR

Rat Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Ra-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 723.6 EUR

Rabbit Polyclonal antibody Anti-CRBN

Anti-CRBN ImmunoStep 50 µg 418.8 EUR

Mouse Anti-Meningococcal A/C/W/Y Oligosaccharides IgM (Combo) ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

600-889-IGM Alpha Diagnostics 1 Kit 1074 EUR

EXOCET Standards

EXOCET-SD-1 SBI each 242.4 EUR

Mouse Keyhole Limpet Hemocyanin (KLH IgM) ELISA Kit

abx053480-96tests Abbexa 96 tests 801.6 EUR

Human Anti-Meningococcal Group A/C/W/Y Oligosaccharides IgM (Combo) ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

600-884-IGM Alpha Diagnostics 1 Kit 1220.4 EUR

Mouse Anti KLH McAb

E61I01501 EnoGene 100ug 411.6 EUR

Anti-MTAP Antibody (KLH)

STJ503536 St John's Laboratory 100 µg 703.2 EUR

Anti-Flag antibody (KLH)

STJ98077 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-BNP antibody (KLH)

STJ97879 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-BNP antibody (KLH)

STJ97880 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-BNP antibody (KLH)

STJ97881 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-Calnexin antibody (KLH)

STJ97891 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-Calregulin antibody (KLH)

STJ97892 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-cAMP antibody (KLH)

STJ97893 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-CD20 antibody (KLH)

STJ97914 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-Clenbuterol antibody (KLH)

STJ97960 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-b-48T DL Develop 48T 547.2 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-b-96T DL Develop 96T 708 EUR

Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Ch-48T DL Develop 48T 511.2 EUR

Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Ch-96T DL Develop 96T 658.8 EUR

Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Hu-48T DL Develop 48T 484.8 EUR

Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Hu-96T DL Develop 96T 621.6 EUR

Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Mu-48T DL Develop 48T 493.2 EUR

Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Mu-96T DL Develop 96T 633.6 EUR

Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Rb-48T DL Develop 48T 609.6 EUR

Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

DLR-IgM-Rb-96T DL Develop 96T 793.2 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RD-IgM-b-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 543.6 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RD-IgM-b-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 750 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-b-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 567.6 EUR

Bovine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-b-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 784.8 EUR

Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Ch-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 524.4 EUR

Chicken Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Ch-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 723.6 EUR

Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Hu-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 493.2 EUR

Human Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Hu-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 678 EUR

Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Mu-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 502.8 EUR

Mouse Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Mu-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 693.6 EUR

Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Rb-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 640.8 EUR

Rabbit Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit

RDR-IgM-Rb-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 890.4 EUR

Human Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-145-KLM Alpha Diagnostics 1 Kit 927.6 EUR

Mouse Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-155-VAM Alpha Diagnostics 1 Kit 854.4 EUR

Monkey Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-180-KLM Alpha Diagnostics 1 Kit 927.6 EUR

Canine Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-190-KLM Alpha Diagnostics 1 Kit 927.6 EUR

Rat anti Mouse IgM

41R-1116 Fitzgerald 100 ug 318 EUR

Mouse anti Rat IgM

41R-1122 Fitzgerald 100 ug 318 EUR

Mouse anti Rat IgM

41R-1123 Fitzgerald 100 ug 318 EUR

Rabbit anti Rat IgM

40C-CB1264 Fitzgerald 2 mg 342 EUR

Goat anti Rat IgM

40C-CB1271 Fitzgerald 1 mg 435.6 EUR

Rat(anti-CMV IgM)

QY-E11747 Qayee Biotechnology 96T 448.8 EUR

Human keyhole limpet hemocyanin(KLH) antibody(IgM) ELISA Kit

CSB-E16534h-24T Cusabio 1 plate of 24 wells 198 EUR

Human keyhole limpet hemocyanin(KLH) antibody(IgM) ELISA Kit

1-CSB-E16534h Cusabio
  • 1080.00 EUR
  • 6571.20 EUR
  • 3480.00 EUR
  • 1 plate of 96 wells
  • 10 plates of 96 wells each
  • 5 plates of 96 wells each

Mouse keyhole limpet hemocyanin (KLH) antibody (IgM) ELISA kit

CSB-E13375m-24T Cusabio 1 plate of 24 wells 198 EUR

Mouse keyhole limpet hemocyanin (KLH) antibody (IgM) ELISA kit

1-CSB-E13375m Cusabio
  • 1080.00 EUR
  • 6571.20 EUR
  • 3480.00 EUR
  • 1 plate of 96 wells
  • 10 plates of 96 wells each
  • 5 plates of 96 wells each

Rat KLH ELISA Kit

ERK0075 Abclonal 96Tests 625.2 EUR

Lyophilized Exosome Standards

ExoA375 ImmunoStep 100 μg 364.2 EUR

Lyophilized Exosome Standards

ExoHT29 ImmunoStep 100 μg 364.2 EUR

Lyophilized Exosome Standards

ExoMCF7 ImmunoStep 100 μg 364.2 EUR

Lyophilized Exosome Standards

ExoPC3 ImmunoStep 100 μg 364.2 EUR

Lyophilized Exosome Standards

ExoPLASMA ImmunoStep 100 μg 364.2 EUR

Lyophilized Exosome Standards

ExoUrine ImmunoStep 100 μg 364.2 EUR

Density Standards 6ml

DEN1012 Scientific Laboratory Supplies PK10 69.31 EUR

Chlorine meter standards

WAT1076 Scientific Laboratory Supplies EACH 269.04 EUR

Human Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgG+IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-135-KGM Alpha Diagnostics 1 kit 927.6 EUR

Bovine/Cow Anti-Keyhole limpet hemocyanin (KLH) IgM ELISA Kit, 96 tests, Quantitative

700-205-KLM Alpha Diagnostics 1 Kit 854.4 EUR

Anti-Myc-tag antibody (KLH)

STJ90105 St John's Laboratory 200 µl 236.4 EUR

Anti-His-tag antibody (KLH)

STJ90106 St John's Laboratory 200 µl 236.4 EUR

Anti-HA-tag antibody (KLH)

STJ90107 St John's Laboratory 200 µl 236.4 EUR

Anti-FLAG-tag antibody (KLH)

STJ90108 St John's Laboratory 200 µl 236.4 EUR

Anti-E alpha antibody (KLH)

STJ98053 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-Ki-67 antibody (KLH)

STJ98194 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-Ki-67 antibody (KLH)

STJ98195 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-PARP-1 antibody (KLH)

STJ98308 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-Actin beta antibody (KLH)

STJ97814 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Anti-Bcl-2 antibody (KLH)

STJ97860 St John's Laboratory 100 µl 280.8 EUR

Custom production of antibodies in 5 Rats using customer supplied antigen (std 63 days protocol)

RAT-5 Alpha Diagnostics 1 1365.6 EUR

Rabbit anti Rat IgM (FITC)

43C-CB1265 Fitzgerald 1.5 mg 346.8 EUR

Rabbit anti Rat IgM (rhodamine)

43C-CB1266 Fitzgerald 1.5 mg 363.6 EUR

Rabbit anti Rat IgM (biotin)

43C-CB1268 Fitzgerald 1.5 mg 441.6 EUR

Rabbit anti Rat IgM (HRP)

43C-CB1269 Fitzgerald 1.5 mg 478.8 EUR

Goat anti Rat IgM (FITC)

43C-CB1272 Fitzgerald 1 mg 436.8 EUR

Goat anti Rat IgM (rhodamine)

43C-CB1273 Fitzgerald 1 mg 482.4 EUR

Goat anti Rat IgM (biotin)

43C-CB1275 Fitzgerald 1 mg 466.8 EUR

Goat anti Rat IgM (HRP)

43C-CB1276 Fitzgerald 1 mg 534 EUR

Mouse anti Rat IgM (HRP)

43R-1632 Fitzgerald 100 ug 338.4 EUR

Mouse anti Rat IgM (HRP)

43R-1633 Fitzgerald 100 ug 338.4 EUR

Goat anti-Rat IgM Antibody

abx401442-05mg Abbexa 0.5 mg 444 EUR

Goat Anti-Rat IgM-AP

LF-SA8011AP Abfrontier 1.0 ml 423.6 EUR

Goat Anti-Rat IgM-BIOT

LF-SA8011B Abfrontier 1.0 mg 374.4 EUR

Goat Anti-Rat IgM-FITC

LF-SA8011F Abfrontier 1.0 mg 328.8 EUR

Goat Anti-Rat IgM-HRP

LF-SA8011H Abfrontier 1.0 ml 336 EUR

Goat Anti-Rat IgM-PE

LF-SA8011P Abfrontier 0.5 mg 524.4 EUR

Goat Anti-Rat IgM-TXRD

LF-SA8011T Abfrontier 1.0 mg 294 EUR

Korelowało to z wcześniejszymi testami funkcji makrofagów i neutrofili in vitro (ocena jonów migrujących, fagocytozy, wybuchu oksydacyjnego i aktywności bakteriobójczej), które wykazały, że R406 nie wpływa niekorzystnie na funkcję makrofagów lub neutrofili we wrodzonych odpowiedziach immunologicznych. Podsumowując, wyniki te pokazują , że R406 ma minimalną funkcjonalną immunotoksyczność pomimo jego działania limfocytopenicznego, co sugeruje, że hamowanie Syk może nie prowadzić do niedopuszczalnych działań niepożądanych opartych na mechanizmach.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany. Wymagane pola są oznaczone *